由人供體角膜分離并培養(yǎng)角膜內(nèi)皮細胞(CEnC)。采用3T3成纖維細胞輔助和NGF,IL-6的Opti-MEM培養(yǎng)液,成功培養(yǎng)人角膜內(nèi)皮細胞并傳代。將人乳頭瘤病毒E6,E7片段插入雙嗜逆轉(zhuǎn)錄病毒,制成載體(LXSN16E6E7)并轉(zhuǎn)染人角膜內(nèi)皮細胞。同法制備端粒酶hTERT轉(zhuǎn)基因角膜內(nèi)皮細胞。即時PCR檢測端粒酶活性,核型鑒定及轉(zhuǎn)染基因表達。RT-PCR檢測角膜內(nèi)皮細胞特異性膠原Ⅷ-α1表達...
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