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    雞γ-干擾素基因的克隆與原核表達(dá)

    2004年 應(yīng)用技術(shù)
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      應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)技術(shù),通過一對(duì)自行設(shè)計(jì)的引物,從經(jīng)ConA誘導(dǎo)活化的雞脾淋巴細(xì)胞的RNA中擴(kuò)增出一特異性基因片段,其大小約為500bp。該片段經(jīng)酶切和測序鑒定為雞IFN-γ基因,將其插入原核表達(dá)載體pGEX4T-1,并導(dǎo)入大腸桿菌BL21細(xì)胞中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng),獲得分子量約為43000的蛋白帶,表明所克隆的CHIFN-γ基因在原核細(xì)胞中得到表達(dá)。...

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